I. NGUYÊN LÝ

Tế bào được dàn mỏng và cố định trên lam kính bằng cồn tuyệt đối. Màng, nguyên sinh chất, các đặc hiệu trong nguyên sinh chất, nhân của tế bào sẽ bắt mầu đặc hiệu với thuốc nhuộm Giemsa.

II. CHỈ ĐỊNH

Tiêu bản máu, tiêu bản chất dịch (dịch phế quản, dịch các màng , dịch ổ bụng...)

III. CHỐNG CHỈ ĐỊNH

Không có chống chỉ định

IV. CHUẨN BỊ

1. Người thực hiện

KTV khoa Huyết học – Truyền máu

2. Bệnh phẩm

- Tiêu bản cần nhuộm được đánh dấu: Tên bệnh nhân, khoa phòng.

- Tiêu bản để khô.

3. Chuẩn bị phương tiện, hóa chất:

- Phương tiện:

+ Bút chì kính

+ Khay men

+ Ống đong các cỡ: 10ml, 20ml

+ Pipet nhỏ giọt

+ Đũa thủy tinh

+ Giá nhuộm, giá cắm

+ Đồng hồ

- Hóa chất:

+ Cồn tuyệt đối

+ Thuốc nhuộm Giemsa mẹ:

- Nhuộm thường quy (dung dịch giemsa 3- 4%): Pha 9,7 ml nước cất với 0,3 ml Giemsa mẹ, khi nhuộm để 30 – 45 phút.
- Nhuộm nhanh (dung dịch giemsa 10%): Pha 9 ml nước cất với 1ml giemsa mẹ, khi nhuộm để 15 – 20 phút.

+ Nước cất.

4. Phiếu xét nghiệm

Giấy chỉ định xét nghiệm ghi đầy đủ thông tin về người bệnh: họ tên, tuổi, gường bệnh, khoa phòng, chẩn đoán.

V. CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

- Cố định tiêu bản giọt đàn, tiêu bản chất dịch bằng cách tay trái cầm tiêu bản nghiêng 30 độ,tay phải cầm pipet nhỏ 3- 4giọt cồn tuyệt đối lên phần đầu của tiêu bản. Dùng pipet gạt ngang cho cồn tràn phủ khắp diện tích mẫu bệnh phẩm, vừa gạt vừa nghiêng tiêu bản cho cồn chảy hết về đuôi của tiêu bản. Cắm tiêu bản lên giá cho khô.

- Đối với tiêu bản giọt đặc quá dày hoặc bị bẩn thì phải dung giải bằng cách nhỏ nước cất hoặc dung dịch Giemsa 1% kín giọt máu, để 1- 2 phút, đổ nước đi rồi cắm tiêu bản lên giá cho khô.

- Xếp tiêu bản lên giá, nhỏ giọt dung dịch thuốc nhuộm phủ kín diện tích mẫu

bệnh phẩm, để thời gian đúng với quy định.

- Rửa tiêu bản dưới vòi nước chảy nhẹ, không đổ thuốc nhuộm trước, không để nước xối trực tiếp vào giọt máu, để tiêu bản khô tự nhiên.

VI. NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ

- Soi kính hiển vi, nhận định kết quả và nhận xét tiêu bản nhuộm.
- Ghi kết quả xét nghiệm.

V. SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ

- Khi nhuộm tiêu bản bị bong bệnh phẩm do cố định cồn không tốt

- Tiêu bản kéo quá dầy khó nhận định được hình thái tế bào

- Tiêu bản nhuộm bị mờ không rõ hình thái tế bào do pha thuốc nhuộm không đúng tỷ lệ