I. NGUYÊN LÝ

Kỹ thuật xác định kháng nguyên Le^a của hệ Lewis bằng phương pháp gelcard có nguyên lý như sau: Anti Le^aloại IgM có sẵn trong tấm gelcard sẽ gây ngưng kết trực tiếp hồng cầu của những cá thể mang kháng nguyên Le^a sau khi tấm gelcard được ly tâm [1], [2].

II. CHỈ ĐỊNH

Xác định kháng nguyên Le^a của hệ Lewis:Được chỉ định giống như chỉ định xác định kháng nguyên C của hệ Rh (Kỹ thuật ống nghiệm).

III. CHỐNG CHỈ ĐỊNH

Không có chống chỉ định.

IV. CHUẨN BỊ

1. Người thực hiện

Bác sĩ, cử nhân, kỹ thuật viên, điều dưỡng trung học.

2. Phương tiện - Hóa chất

2.1. Trang thiết bị, dụng cụ, vật tư tiêu hao:

Giống như trang thiết bị, dụng cụ, vật tư tiêu hao của kỹ thuật xác định kháng nguyên C của hệ Rh (Kỹ thuật gelcard).

2.2. Thuốc thử và hóa chất:

Tấm gelcard đã có sẵn anti Le^a loại IgM; Nước muối sinh lý 0,9%; Nước cất.

2.3. Mẫu máu để xác định kháng nguyên Le^a của hệ Lewis:

Gồm một ống máu tĩnh mạch đã được chống đông bằng EDTA: 2 ml.

3. Thời gian làm xét nghiệm:60 phút

V. CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

1. Chuẩn bị dụng cụ, hóa chất, sinh phẩm đầy đủ: Chuẩn bị dung dịch hồng cầu 5% (500 µl dung dịch hòa loãng I và 25 µl hồng cầu khối của bệnh nhân/người hiến máu, trộn đều, ủ dịch treo hồng cầu 10 phút ở nhiệt độ từ 18 - 25^oC). Sử dụng hồng cầu đã ủ trên trong vòng 15 phút.

2. Nhận bệnh phẩm và phiếu yêu cầu xác định kháng nguyên Le^a: Kiểm tra và đối chiếu các thông tin trên ống máu và phiếu xét nghiệm cho phù hợp.

3. Tiến hành định nhóm kháng nguyên Le^a của hệ Lewis 2:

- Bước 1:Ghi đầy đủ thông tin của người bệnh/người hiến máu lên tấm gelcard.

- Bước 2:Mở tấm bảo vệ phủ lên các cột gel theo đúng quy định.

- Bước 3:Thêm 10 hoặc 12,5 µl dung dịch hồng cầu bệnh nhân/người hiến máu 5% đã chuẩn bị ở trên vào giếng gelcard đã có sẵn anti Le^a.

- Bước 4:Ly tâm gelcard bằng máy ly tâm chuyên dụng trong 10 phút.

- Bước 5:Đọc kết quả theo hướng dẫn của nhà sản xuất sinh phẩm.

VI. NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ

- Phản ứng ngưng kết: Có kháng nguyên Le^a trên bề mặt hồng cầu.

- Phản ứng không ngưng kết: Không có kháng nguyên Le^a trên hồng cầu.

Những điểm cần chú ý khi làm xét nghiệm:

Giống như những điểm cần chú ý khi làm xét nghiệm xác định kháng nguyên C của hệ Rh.