I. NGUYÊN LÝ

Kỹ thuật xác định kháng nguyên Kp^a của hệ nhóm máu Kell được dựa trên nguyên lý của phản ứng ngưng kết, sử dụng thuốc thử kháng gglobulin người để xác định sự có mặt của các kháng thể Kp^a loại IgG đã được cảm nhiễm trên bề mặt hồng cầu của những cá thể mang kháng nguyên Kp^a [1], [2].

II. CHỈ ĐỊNH

Xác định kháng nguyên Kp^a của hệ Kell:Được chỉ định giống như chỉ định xác định kháng nguyên C của hệ Rh.

III. CHỐNG CHỈ ĐỊNH

Không có chống chỉ định.

IV. CHUẨN BỊ

1. Người thực hiện

Bác sĩ, cử nhân, kỹ thuật viên, điều dưỡng trung học.

2. Phương tiện - Hóa chất

2.1. Trang thiết bị, dụng cụ, vật tư tiêu hao:

Giống như trang thiết bị, dụng cụ, vật tư tiêu hao của quy trình xác định kháng nguyên C của hệ Rh.

2.2. Thuốc thử và hóa chất:

Thuốc thử anti Kp^a loại IgG; Nước muối sinh lý 0,9%; Nước cất…

2.3. Mẫu máu để xác định kháng nguyên Kp^a của hệ Kell:

Gồm một ống máu tĩnh đã mạch được chống đông bằng EDTA: 2 ml.

3. Thời gian làm xét nghiệm:60 phút

V. CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

1. Chuẩn bị dụng cụ, hóa chất, sinh phẩm, trang thiết bị: Trên ống nghiệm được đánh số hoặc ghi nhãn đầy đủ thông tin của người cần xác định kháng nguyên Kp^a.

2. Nhận mẫu máu và phiếu yêu cầu xác định kháng nguyên Kp^a: Kiểm tra và đối chiếu các thông tin trên mẫu máu cần xác định kháng nguyên Kp^a với phiếu yêu cầu xét nghiệm. Kiểm tra về số lượng và chất lượng mẫu máu.

3. Tiến hành xác định kháng nguyên Kp^a của hệ nhóm máu Kell:

- Bước 1:Chuẩn bị hồng cầu cần xác định kháng nguyên Kp^a 5% (1thể tích hồng cầu khối và 19 thể tích nước muối sinh lý 0,9%);

- Bước 2:Nhỏ 1 giọt thuốc thử anti Kp^a vào ống nghiệm đã chuẩn bị ở trên;

- Bước 3:Thêm 1 giọt hồng cầu 5% của người cần xác định kháng nguyên Kp^b vào ống nghiệm trên;

- Bước 4:Ủ từ 15 - 20 phút ở nhiệt độ 37^oC.

- Bước 5:Trộn đều, ly tâm 1000 vòng trong 20 giây.

- Bước 6:Đọc kết quả và ghi lại mức độ ngưng kết.

- Bước 7:Rửa 3 lần bằng nước muối sinh lý 0,9%, loại bỏ hết dịch nổi.

- Bước 8:Nhỏ vào ống nghiệm trên 2 giọt kháng globulin.

- Bước 9:Trộn đều, ly tâm 1000 vòng trong 20 giây.

- Bước 10:Đọc kết quả và ghi lại mức độ phản ứng, nếu phản ứng không ngưng kết, nhỏ thêm một giọt hồng cầu chứng và lặp lại bước 5 và 6. Nếu kết quả vẫn không ngưng kết là không có giá trị và phải lặp lại xét nghiệm.

VI. NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ

- Phản ứng ngưng kết: Có kháng nguyên Kp^a trên bề mặt hồng cầu.

- Phản ứng không ngưng kết: Không có kháng nguyên Kp^a trên hồng cầu.

Những điểm cần chú ý khi làm xét nghiệm:

Giống như những điểm cần chú ý khi làm xét nghiệm xác định kháng nguyên C của hệ Rh.